chromatographie

[lele23p]

Bonjour je réaliser cet exercice et je suis perdue quelqu'un pourrait-il m'aider ? merci 

Sur une colonne d'une résine échangeuse d'anions (pH = 5 ) on dépose 0,5 ml d'une solution renfermant 2 acides aminés: de l'acide glutamique et un acide aminé neutre, chacun s'y trouvant à la concentration de 4 mg/ml. On élue d'abord avec de l'eau distillée, puis avec HCl 1M. On recueille des fractions de 2 ml. Sur une bande de papier filtre on dépose 10 µl de chacune des fractions. Après révélation à la ninhydrine, on obtient des taches violettes et des taches jaunes. Les deux séries de taches sont séparées par quelques dépôts non colorés. On rassemble dans une fiole jaugée de 50 ml toutes les fractions ayant donné une tache jaune. On complète à 50 ml avec de l'eau distillée. A 0,2 ml de cette solution on ajoute 0,8 ml d'eau, 3 ml d'acide acétique et 1 ml de réactif a la ninhydrine. On développe la coloration et on mesure la densité optique (A) au spectrophotomètre, contre un témoin réactif, dans une cuve de 1 cm de trajet optique. A = 0,22. Le coefficient d'absorption molaire de l'ammoacide concerné est e = 17 250 mol/l/cm..

Commenter les différentes étapes de la chromatographie.

Identifier l'amino-acide neutre.

Calculer le rendement de la colonne.